Sanguineous normothermic, intermittent cardioplegia, effects on hypertrophic myocardium: morphometric, metabolic and ultrastructural studies in rabbits hearts / Efeitos da cardioplegia sanguínea normotérmica intermitente, em miocárdio hipertrófico: estudos morfométricos, metabólicos e ultraestruturais em corações coelhos

OBJECTIVES: The present investigation aimed to study the protective effect of intermittent normothermic cardioplegia in rabbit's hypertrophic hearts. METHODS: The parameters chosen were 1) the ratio heart weight / body weight, 2) the myocardial glycogen levels, 3) ultrastructural changes of light and electron microscopy, and 4) mitochondrial respiration. RESULTS: 1) The experimental model, coarctation of the aorta induced left ventricular hypertrophy; 2) the temporal evolution of the glycogen levels in hypertrophic myocardium demonstrates that there is a significant decrease; 3) It was observed a time-dependent trend of higher oxygen consumption values in the hypertrophic group; 4) there was a significant time-dependent decrease in the respiratory coefficient rate in the hypertrophic group; 5) the stoichiometries values of the ADP: O2 revealed the downward trend of the values of the hypertrophic group; 6) It was possible to observe damaged mitochondria from hypertrophic myocardium emphasizing the large heterogeneity of data. CONCLUSION: The acquisition of biochemical data, especially the increase in speed of glycogen breakdown, when anatomical changes are not detected, represents an important result even when considering all the difficulties inherent in the process of translating experimental results into clinical practice. With regard to the adopted methods, it is clear that morphometric methods are less specific. Otherwise, the biochemical data allow detecting alterations of glycogen concentrations and mitochondria respiration before the morphometric alterations should be detected.

OBJETIVOS: O presente estudo teve como objetivo estudar o efeito protetor da cardioplegia normotérmica intermitente em corações hipertróficos de coelhos. MÉTODOS: Os parâmetros escolhidos foram: 1) relação peso cardíaco/peso corporal; 2) níveis de glicogênio nos músculos cardíacos; 3) alterações ultraestruturais por microscopia óptica e eletrônica; e 4) respiração mitocondrial. RESULTADOS: 1) O modelo experimental de coarctação da aorta induziu hipertrofia ventricular esquerda; 2) a evolução temporal dos níveis de glicogênio no miocárdio hipertrófico demonstra que há diminuição significativa; 3) observou-se tendência dependente do tempo para maiores valores do consumo de oxigênio para o grupo hipertrófico; 4) houve diminuição dependente do tempo da taxa de coeficiente respiratório no grupo hipertrófico; 5) os valores estequiométricos da ADP: O2 revelou a tendência decrescente no grupo hipertrófico; 6) observaram-se lesões mitocondriais do miocárdio hipertrófico, enfatizando a grande heterogeneidade dos dados. CONCLUSÃO: A aquisição de dados bioquímicos, principalmente o aumento na velocidade de quebra do glicogênio, quando mudanças anatômicas não são detectadas, representa um resultado importante, mesmo quando se consideram todas as dificuldades inerentes ao processo translacional de resultados experimentais para a prática clínica. No que diz respeito aos métodos adotados, é evidente que os métodos morfométricos são menos específicos. Os dados bioquímicos permitem a detecção de alterações das concentrações de glicogênio e respiração mitocondrial antes das alterações morfométricas serem detectadas.

Pré-condicionamento precoce da medula espinal isquêmica: pesquisa em coelhos / Early preconditioning of the ischemic spinal cord: experimental study in rabbits

Investigou-se a possibilidade de desencadear o fenômeno do pré-condicionamento, imediatamente antes do esquemia de 30 minutos, como meio adicional de proteçao medular nos casos de pinçamento aórtico prolongado. Oitenta e sete coelhos da raça Nova Zelândia, distribuídos em 6 grupos, foram estudados. A isquemia medular resultou do pinçamento (P) da aorta abdominal, imediatamente após a origem da artéria renal esquerda. Estimulou-se o pré-condicionamento por curtos e repetidos períodos de isquemia, assinalados no texto por grifo, seguidos por variáveis tempos de reperfusao. Grupo I - Controle: 20 animais tiveram a aorta pinçada por 30 min. Dois (10 por cento) recuperaram integralmente a motricidade e a sensibilidade das patas posteriores e cauda; 18 (90 por cento) tornaram-se paraplégicos. Grupo II - Operaçao simulada: 10 (100 por cento) animais operados como os do grupo anterior, exceto pelo nao pinçamento da aorta, recuperaram plenamente as funçoes sensitivo-motoras. Grupo III - Pré-condicionamento: 10 animais - (P) 1 min r15 min r(P) 30 min r reperfusao final. Todos (100 por cento) tornaram-se paraplégicos. Grupo IV - Pré-condicionamento: 6 animais - (P) 1 min r 5 min r (P) 2 min r 5 min r(P) 2 min r 5 min (P) 30 min _ reperfusao final. Cinco (83,33 por cento) coelhos ficaram paraplégicos e 1 (16,66 por cento) ficou monoplégico. Grupo V - Clorpromazina: 20 animais receberam clorpromazina por via endovenosa, na dose de 2 mg/Kg peso, 10 min antes do pinçamento aórtico. Onze (55 por cento) tiveram recuperaçao sensitivo-motora integral e 9 (45 por cento), ficaram paraplégicos. Grupo VI - Clorpromazina + pré-condicionamento: 21 animais receberam a clorpromazina como os do grupo anterior, sendo pré-condicionados da forma (P) 1 min r 5 min r(P) 1 min r 5min r(P) 30 min r reperfusao final. Nove 42,8 por cento) tiveram recuperaçao sensitivo-motora integral e 2 (9,52 por cento), recuperaçao parcial. Os demais (47,68 por cento) ficaram paraplégicos. A análise estatística demonstrou nao haver diferença significativa entre os resultados dos grupos III e IV, e quando ambos foram comparados com o grupo I. Nao foi significativa a diferença entre os grupos V e VI, mas foi significativa quando ambos foram comparados com o grupo I (p<0,05). Estudo histológico - Outros 12 animais foram usados exclusivamente para o estudo histológico sob microscopia óptica: 6 do grupo controle e 6 com pré-condicionamento...

Proteçäo farmacológica da medula espinal isquêmica / Pharmacological protection of the ischemic spinal cord

Estudou-se a açao protetora da quetamina (30mg/Kg, EV) e da clorpromazina (2mg/Kg,EV), sobre a medula espinal de ratos Wistar, submetida à isquemia de 30 min, por oclusao da aorta torácica, seguida de reperfusao. Em 70 animais, com peso médio de 380g, divididos em 7 grupos iguais, obtiveram-se os seguintes resultados porcentuais referentes à integral recuperaçao sensitivo-motora: 1) "Sham-operation": 100 por cento; 2) isquemia-reperfusao: 0 por cento; 3) quetamina, 1 min antes da isquemia: 30 por cento; 4) quetamina, 10 min. antes da isquemia: 50 por cento; 5) clorpromazina, 1 min antes da isquemia: 50 por cento; 6) clorpromazina, 1 min. antes da reperfusao: 10 por cento; 7) quetamina+clorpromazina, 1 min antes da isquemia: 60 por cento. Tanto a quetamina quanto a clorpromazina protegeram parte dos animais cuja medula espinal fora submetida à isquemia-reperfusao. Contudo, ao se comparar os animais protegidos, as diferenças de resultados só alcançaram significância estatística entre os grupos 6 e 7. O estudo histológico, por microscopia óptica, confirmou a açao protetora de ambos os agentes farmacológicos. A perfusao do espaço subaracnóideo dos animais cuja medula espinal fora submetida à isquemia-reperfusao demonstrou quantidade excessiva dos aminoácidos neuroexcitadores, L-aspartato e L-glutamato.

Alteraçöes agudas hepatocelulares após ligadura da artéria hepática em ratos com colestase extra-hepática / Acute hepatocellular changes after hepatic artery ligation in rats with chronic extrahepatic cholestasis

Fígado de animais com colestase extra-hepática crônica (CEHC) apresentam diminuiçäo de sua reserva funcional, particularmente, pela diminuiçäo da funçäo mitocondrial causada por vários fatores, como efeito tóxico das bilirrubinas e sais biliares e isquemia parcial conseqüente à diminuiçäo do fígado da artéria hepática (AH) nos casos de CEHC. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a funçäo hepática após ligadura da AH em ratos portadores de colestase extra-hepática crônica. Foram estudados 60 ratos machos Wistar (300-350g) divididos em 4 grupos: A - controles (n=15); B - CEHC (n=15) submetidos à cirurgia simulada para ligadura da AH e D - n=15) CEHC submetidos à ligadura da AH por 3 horas. Nos grupos C e D houve perda sanguínea de 1,4 a 2% do peso corporal dos ratos durante a operaçäo com duraçäo de 20 a 25 minutos. Os animais dos grupos estudados apresentaram valores séricos crescentes de alanina aminotransferase (ALT). A

Alteraçöes näo desacopladoras da fosforilaçäo oxidativa mitocondrial na colestase extra-hepática / Non uncoupling alterations of mitochondrial oxidative phosphorylation in extrahepatic cholestasis

Estudou-se 28 ratos machos Wistar com peso entre 200 e 250 g. divididos em dois grupos: Controle (n = 14) e grupo com obstruçäo biliar extra-hepática OBE) (n = 14). O grupo OBE os animais foram submetidos a ligadura dupla do ducto hepático (dh) para induçäo da obstruçäo biliar. O grupo controle foi submetido apenas a cirurgia fictícia para ligadura do dh. O período de observaçäo foi de sete dias, após o que foram sacrificados por exsanguinaçäo. O estudo da funçäo mitocondrial mostrou que os ratos do grupo OBE apresentaram razäo de controle respiratório mitocondrial (RCR) e respiraçäo ativada (estado III) diminuidas significativamente (P < 0,05) em comparaçäo ao grupo controle. A respiraçäo basal (estado IV) foi semelhante em ambos os grupos . Houve aumento significativo das bilirrubinas (total e fraçöes) e fosfatase alcalina no grupo OBE em relaçäo ao grupo controle (P < 0,05). Em conclusäo, o desacoplamento da fosforilaçäo oxidativa mitocontrial descrita na literatura, näo foi observada no presente estudo

Portal flow and mitochondrial function during extrahepatic cholestasis

This study was designed to determine portal blood flow and mitochondrial and hepatic function during extrahepatic obstruction. Twenty-two male Wistar rats which had undergone bile duct ligation were compared 7 days later to 20 sham-operated controls. Portal flow and mitochondrial respiratory control ratio were reduced by 50% and 35%, respectively (P < 0.01), and serum alanine-aminotransferase levels increased significantly (P < 0.01) in the extrahepatic cholestatic group. These results suggest that cholestasis may cause an imbalance between the energy supply and the high demand of the liver leading to a state of partial ischemia

Funçäo mitocondrial do fígado na colestase extra-hepática: efeito da clorpromazina / Liver mitochondrial function in the extrahepatic cholestasis: effect of the clorpromazine

Estudou-se 56 ratos machos Wistar com peso entre 200 a 250g divididos em quatro grupos de quatorze cada um. Quatorze ratos foram submetidos à ligadura dupla do ducto hepático para induçäo da obstruçäo biliar extra-hepática (grupo O). Quatorze ratos com obstruçäo biliar extra-hepática (grupo Oc), administrou-se cloridrato de clorpromazina (CPZ) (10mg/Kg peso corpóreo/dia). Os animais do grupo O e Oc foram comparados com animais controles submetidos à cirurgia fictícia para obstruçäo biliar extra-hepática sem CPZ (grupo C) e com CPZ (grupo Cc). O período de observaçäo foi de 7 dias. Os ratos colestáticos apresentaram aumento de bilirrubinas total e fraçöes, fosfatase alcalina e alanino-aminotransferase (ALT) e diminuiçäo da funçäo mitocondrial em comparaçäo com o grupo controle (P<0,05). A CPZ administrada nos animais colestáticos (Oc), diminuiu os valores da ALT (P<0,05 vs O) e melhorou a funçäo mitocondrial (P<0,05 vs O). Como os valores das bilirrubinas e fosfatase alcalina foram semelhantes em ambos os grupos (F>0,05 O vs.Oc), é possível supor que a açäo desta droga ocorreu em algum ponto da estrutura mitocondrial e da membrana citoplasmática, independente da açäo das bilirrubinas, provavelmente lesadas pela isquemia hepática